抗体荧光标记试剂及标记服务
Super Fluor 647 SE (~Alexa Fluor 647 SE)
商品编号: 1031-1mg
3095元/1mg
产品介绍

Super Fluor 488555, 647, 680, 750 SE活化酯标记抗体

Super Fluor®北京富百科生物技术有限公司注册商标,未经授权严禁使用!

Super Fluor SE=Super Fluor NHS=Super Fluor琥珀酰亚胺酯 (琥珀酰亚胺酯SE(Succinimidyl esters) = N-羟基琥珀酰亚胺NHS(N-Hydroxy succinimide)

  Super Fluor® 系列(可替代Alexa Fluor 系列)荧光探针,具有更强的荧光强度,更广的pH应用范围(pH 410更好的抗淬灭性。在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等荧光染料。 

 Super Fluor 488555, 647, 680, 750活化酯的性质参数


488

555

647

680

750

活化酯分子量

900

 1250

 1300

1150

 1300

最大吸收波长(nm)

494

555

647

680

750

摩尔吸光系数(M-1cm-1)

71 000

150 000

239 000

184000

240 000

最大发射波长(nm)

524

565

665

702

775

A280nm /Amax

11%

8%

3%

5

4%

 

2. Super Fluor 标记抗体的参考方案:

1) 蛋白溶解:用0.1 M NaHCO3溶解至终浓度为2mg/mL

   1ml 去离子水加入84mgNaHCO3瓶中,配成1M 的碳酸氢钠溶液。振荡或吹打至完全溶解。该溶液pH 8.326保存可用星期;若抗体是溶液,将抗体稀释至2mg/mL,再加入1/10 体积的上述碳酸氢钠溶液;若抗体是冻干粉,将1M 碳酸氢钠溶液用10 倍去离子水稀释成0.1M 后,用其将抗体溶成2mg/mL的溶液;

2染料溶解:活化Super Flour SE染料固体粉末从冰箱放入干燥器中慢慢升至常温后,用无水DMSO(推荐使用SigmaAldrich货号276855)将染料配置浓度为1 mg/mL

3标记:1mL蛋白溶液中缓慢加入适量染料溶液,(蛋白:染料摩尔比=1:2050;质量比可在以下范围内优化10200ug Super Flour SE 每毫克IgG抗体)。同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。也可以直接将蛋白溶液直接加入染料的固体粉末的试剂瓶中,同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。

4纯化:用透析法或者葡聚糖Sephadex纯化产品后,产品冷冻干燥成粉末或在0.01 M PBS/2mM叠氮化钠溶液中,-20避光储存。

5)贮存:标记好的蛋白贮存于26,避光。若纯化的蛋白偶联物浓度小于1mg/mL,加入BSA 或其他稳定蛋白110mg/ml。在2mM 叠氮钠存在的情况下,2度可保存几个月。保存更长时间,则需分装后-20保存。避免反复冻融,避光保存。


3.计算标记比例F/P值:

对于IgG 等大多数抗体来说,摩尔吸光系数为203000F/P值在4之间是最合适。

Super Flour 647标记蛋白F/P值计算:

1)用PBS 精确倍数稀释定量的少许纯化过的偶联蛋白,在1cm比色皿中测定280nm650nm的光吸收;

2)计算样品中的蛋白浓度:蛋白摩尔浓度=(A280-(A650×0.03))×稀释倍数/203000

3)计算标记比例:每摩尔蛋白结合的染料摩尔数=A650×稀释倍数/(239000×蛋白摩尔浓度)


4. 活性染料稳定性与储存:

 请注意:未开封的粉末在避光干燥-20可存放6月。其水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的染料最好立即使用;无水的DMSO溶液-20°C保存最多2个星期。

特别提醒:

1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅!

2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!

产品参数
Name Super Fluor 647 SE (~Alexa Fluor 647 SE)
CAT# 1031-1mg CAS# N/A
Storage# −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# 651 Em(nm)# 668
MW# N/A Solvent# Water or DMSO
Name Super Fluor 647 SE (~Alexa Fluor 647 SE)
CAT# 1031-1mg
CAS# N/A
Storage# −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure
Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# 651
Em(nm)# 668
MW# N/A
Solvent# Water or DMSO
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官方微信

400-686-3443