小动物活体成像试剂及标记服务
Super Fluor 680 SE (~Alexa Fluor 680 SE)
商品编号: 1035-1mg
3095元/1mg
产品介绍

Super Fluor 488555, 647, 680, 750活化酯标记抗体

Super Fluor®北京富百科生物技术有限公司注册商标,未经授权严禁使用!

1.产品简介  

 Super Fluor® 系列(可替代Alexa Fluor 系列)荧光探针,具有更强的荧光强度,更广的pH应用范围(pH 410更好的抗淬灭性。在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等荧光染料。 Super Fluor 750 NHS= Super Fluor 750 SE~Alexa Fluor 750 SE 

 Super Fluor 488555, 647, 680, 750活化酯的性质参数


488

555

647

680

750

活化酯分子量

900

 1250

 1300

1150

 1300

最大吸收波长(nm)

494

555

647

680

750

摩尔吸光系数(M-1cm-1)

71 000

150 000

239 000

184000

240 000

最大发射波长(nm)

524

565

665

702

775

A280nm /Amax

11%

8%

3%

5

4%

 

2. Super Fluor 标记抗体的参考方案:

1) 蛋白溶解:用0.1 M NaHCO3溶解至终浓度为2mg/mL

   1ml 去离子水加入84mgNaHCO3瓶中,配成1M 的碳酸氢钠溶液。振荡或吹打至完全溶解。该溶液pH 8.326保存可用星期;若抗体是溶液,将抗体稀释至2mg/mL,再加入1/10 体积的上述碳酸氢钠溶液;若抗体是冻干粉,将1M 碳酸氢钠溶液用10 倍去离子水稀释成0.1M 后,用其将抗体溶成2mg/mL的溶液;

2染料溶解:活化Super Flour SE染料固体粉末从冰箱放入干燥器中慢慢升至常温后,用无水DMSO(推荐使用SigmaAldrich货号276855)将染料配置浓度为1 mg/mL

3标记:1mL蛋白溶液中缓慢加入适量染料溶液,(蛋白:染料摩尔比=1:2050;质量比可在以下范围内优化10200ug Super Flour SE 每毫克IgG抗体)。同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。也可以直接将蛋白溶液直接加入染料的固体粉末的试剂瓶中,同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。

4纯化:用透析法或者葡聚糖Sephadex纯化产品后,产品冷冻干燥成粉末或在0.01 M PBS/2mM叠氮化钠溶液中,-20避光储存。

5)贮存:标记好的蛋白贮存于26,避光。若纯化的蛋白偶联物浓度小于1mg/mL,加入BSA 或其他稳定蛋白110mg/ml。在2mM 叠氮钠存在的情况下,2度可保存几个月。保存更长时间,则需分装后-20保存。避免反复冻融,避光保存。


3.计算标记比例F/P值:

对于IgG 等大多数抗体来说,摩尔吸光系数为203000F/P值在4之间是最合适。

 Super Flour 680标记蛋白F/P值计算:

1)用PBS 精确倍数稀释定量的少许纯化过的偶联蛋白,在1cm比色皿中测定280nm680nm的光吸收;

2)计算样品中的蛋白浓度:蛋白摩尔浓度=(A280-(A650×0.05))×稀释倍数/203000

3)计算标记比例:每摩尔蛋白结合的染料摩尔数=A650×稀释倍数/(184000×蛋白摩尔浓度)


4. 活性染料稳定性与储存:

 请注意:未开封的粉末在避光干燥-20可存放6月。其水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的染料最好立即使用;无水的DMSO溶液-20°C保存最多2个星期。

特别提醒:

1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅!

2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!

产品参数
Name Super Fluor 680 SE (~Alexa Fluor 680 SE)
CAT# 1035-1mg CAS# N/A
Storage# −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# 680 Em(nm)# 702
MW# N/A Solvent# Water or DMSO
Name Super Fluor 680 SE (~Alexa Fluor 680 SE)
CAT# 1035-1mg
CAS# N/A
Storage# −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure
Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# 680
Em(nm)# 702
MW# N/A
Solvent# Water or DMSO
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官方微信

400-686-3443