Calcein, AM

CAS#：148504-34-1

中文名：3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基荧光素,二乙酰甲酯

英文名：3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester

别名：钙黄绿素乙酰甲酯

结构式：

分子式：C₄₆H₄₆N₂O₂₃

分子量：994.86

性质：

1. 外观：白色或浅黄色晶体

2. 纯度：≥90%（HPLC）

3. 产品描述：

Calcein, AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如BCECF, AM和CFDA）相比，Calcein, AM的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。

Calcein, AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光（激发：535 nm，发射：617 nm），因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。

由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定Calcein, AM和PI的合适浓度。

4. 使用方法                                                                              

（1）用DMSO制备1 mM 的Calcein, AM溶液，并用PBS将其稀释制成1～50 μM的Calcein, AM溶液。
（2）将1/10细胞培养基体积的Calcein, AM溶液加入到细胞培养基中。^b)
（3）在37℃培养细胞15～30分钟。
（4）用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
（5）用490 nm激发波长，515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a)  如果Calcein, AM很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如Pluronic F127。
b) 也可以用1/10浓度的Calcein, AM溶液代替培养基。

储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

特别提醒：

1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅。

2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！