Actin-Tracker Green (微丝绿色荧光探针)
1) 母液的配置:使用前将本品回温至室温并简短离心,加入30uL DMSO使其充分溶解,混匀即可获得1000×FITC标记鬼笔环肽母液。根据实验情况,对其分装并于-20℃避光干燥保存。
2) 工作液的配置:吸取1 µL以上FITC标记鬼笔环肽母液至1 mL PBS(含1%BSA)缓冲液中即可得到1×工作液。
【注】:不同的细胞染色情况不同,相应FITC鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。
2)吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次。
3)使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10~30min。
注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
5)室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min。
7)取100µL/孔(96孔板)配制好的 FITC标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育30min(通常情况下,4℃~37℃孵育皆可)。
注意:为了降低背景,可于FITC标记的鬼笔环肽工作液内加入1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
9)使用100 µL/孔(96孔板)即用型DAPI溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约30s。
11)荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择FITC激发/发射滤片(Ex/Em=496/516nm)和DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。
4) 丙酮或透化液0.5% Triton X-100(溶于PBS缓冲液)
5) Fluoromount-GTM 水溶性封片剂(不含DAPI) ,DAPI
6) DAPI Fluoromount-GTM 水溶性封片剂(含DAPI)
10) 组装有FITC激发/发射滤片,以及DAPI激发/发射滤片的荧光显微镜或共聚焦显微镜。
3. 本产品为冻干粉形式,微量不易观察 使用前瞬时离心,加溶剂溶解后使用, 溶解后接近无色。
Name | FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽 Actin-Tracker Green (微丝绿色荧光探针) | ||
---|---|---|---|
CAT# | C1033 | CAS# | |
Storage# | -20 °C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing! | Shelf Life# | 24 months |
Ex(nm)# | Em(nm)# | ||
MW# | Solvent# |
Name | FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽 Actin-Tracker Green (微丝绿色荧光探针) |
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CAT# | C1033 |
CAS# | |
Storage# | -20 °C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing! |
Shelf Life# | 24 months |
Ex(nm)# | |
Em(nm)# | |
MW# | |
Solvent# |