详细说明书
技术资料线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
取10～60万细胞，重悬于0.5mL细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
加入0.5mL JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
在孵育期间，按照每1mL JC-1染色缓冲液（5×）加入4mL蒸馏水的比例，配制适量的JC-1染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
37℃孵育结束后，600g 4℃离心3～4分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
再用适量JC-1染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
注意：对于贴壁细胞，如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测，可以先收集细胞，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
对于六孔板的一个孔，吸除培养液，根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次，加入1mL细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。
加入1mL JC-1染色工作液，充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
在孵育期间，按照每1mL JC-1染色缓冲液（5×）加入4mL蒸馏水的比例，配制适量的JC-1染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
37℃孵育结束后， 吸除上清，用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤2次。
把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1染色缓冲液（1×）稀释5倍。
0.9mL 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1mL总蛋白量为10～100μg纯化的线粒体。
1. JC-1（200×）在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20～25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤时，使JC-1染色缓冲液（1×）保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4. JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
5. 请勿把JC-1染色缓冲液（5×）全部配制成JC-1染色缓冲液（1×），本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液（5×）。
6. 如果发现JC-1染色缓冲液（5×）中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
7. CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，有毒，请注意小心防护。
8. 本公司所有产品仅限用于研发，操作时必须戴口罩/手套/实验服和其它生化实验室防护措施。
| Name | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) | ||
|---|---|---|---|
| CAT# | 22202-100T | CAS# | N/A |
| Storage# | −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing | Shelf Life# | 24 months |
| Ex(nm)# | N/A | Em(nm)# | N/A |
| MW# | N/A | Solvent# | N/A |
| Name | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) |
|---|---|
| CAT# | 22202-100T |
| CAS# | N/A |
| Storage# | −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing |
| Shelf Life# | 24 months |
| Ex(nm)# | N/A |
| Em(nm)# | N/A |
| MW# | N/A |
| Solvent# | N/A |
