本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品,本试剂盒共可以检测100个样品;对于12孔中的样品,本试剂盒共可以检测200个样品。
取10~60万细胞,重悬于0.5mL细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
加入0.5mL JC-10染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
在孵育期间,按照每1mL JC-10染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-10染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
37℃孵育结束后,600g 4℃离心3~4分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
再用适量JC-10染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,可以先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
在孵育期间,按照每1mL JC-10染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-10染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
37℃孵育结束后, 吸除上清,用JC-10染色缓冲液(1×)洗涤2次。加入2mL细胞培养液,培养液中可以含有血清和酚红。
保存条件:-20℃避光保存,尽量避免反复冻融,有效期一年。超纯水和JC-10染色缓冲液(5×)也可4℃保存。
1. JC-10(200×)在4℃或冰浴等较低温度下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20~25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 装载完JC-10后用JC-10染色缓冲液(1×)洗涤时,使JC-10染色缓冲液(1×)保持4℃左右,此时的洗涤效果较好。
4. JC-10探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
5. 请勿把JC-10染色缓冲液5×全部配制成JC-10染色缓冲液1×,本试剂盒使用过程中需直接使用JC-10染色缓冲液5×。
6. 如果发现JC-10染色缓冲液(5×)中有沉淀,必须全部溶解后才能使用,为促进溶解可以在37℃加热。
7. CCCP为线粒体电子传递链抑制剂,有毒,请注意小心防护。
8. 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅!
9. 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作,同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!
Name | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10) | ||
---|---|---|---|
CAT# | 22206 | CAS# | N/A |
Storage# | −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing | Shelf Life# | 24 months |
Ex(nm)# | N/A | Em(nm)# | N/A |
MW# | N/A | Solvent# | N/A |
Name | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10) |
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CAT# | 22206 |
CAS# | N/A |
Storage# | −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing |
Shelf Life# | 24 months |
Ex(nm)# | N/A |
Em(nm)# | N/A |
MW# | N/A |
Solvent# | N/A |