高效低毒转染试剂Lipo2000
Lipo2000转染试剂
商品编号: 029-1.5mL
1800元/支/1.5mL
产品介绍

Lipo2000®Transfection Reagent

 

 Lipo2000®, Lip2000®,Lipo3000®和Lip3000®为北京富百科生物技术有限公司注册商标,未经授权严禁使用!


保存:2-4℃保存一年。(避免冷冻)


产品说明

 富百科独有专利配方Lipo2000转染效率介于Lip2000Lip3000之间,毒性更低,转染效率更高,是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNARNA)转染入真核细胞,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。

适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系)的转染。


质粒DNA的转染

   对大多数细胞来说,DNA(µg)与Lipo2000 (µl)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平,并能减少细胞毒性。

1. 以24孔板为例

贴壁细胞: 转染前一天,用500 µl不含抗生素的培养基接种0.5~2×105细胞,使之第二天能达到70-90%汇合。

悬浮细胞:在准备DNA-Lip2000复合物之前,用500 µl不含抗生素的培养基接种4~8×105细胞即可。

2. 对每个转染样品,进行以下操作

a. 在eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA轻柔混匀,制成DNA稀释液。

b. 在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl Lipo2000(注意用前先混匀),轻柔混匀,制 成Lip2000 稀释液,室温静置5分钟。

c. 将DNA稀释液和Lip2000稀释液混合,轻柔混匀,室温静置20分钟, 形成DNA-Lip2000复合物。DNA-Lip2000复合物在室温下可稳定存在6小时。

3. 将DNA-Lip2000复合物加入到接种好的细胞中,将培养板轻轻地前后摇动,使复合物分散均匀。

4. 在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18~48小时。

5. 如果要筛选稳定细胞株,则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中,第二天加 入选择性培养基进行筛选。

 

质粒DNA转染的优化 为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响,可以对DNA和Lip2000的比例以及细胞密度进行优化,一 般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA (µg)和Lip2000 (µl) 的比例。

 

不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及Lipo2000用量

屏幕快照 2020-02-23 23.02.39.png


常见细胞的转染效率(仅供参考,实验条件不同转染效率会有差别)

屏幕快照 2020-02-23 23.09.05.png

产品参数
Name Lipo2000转染试剂
CAT# 029-1.5mL CAS# N/A
Storage# 4℃干燥避光 Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# N/A Em(nm)# N/A
MW# N/A Solvent# N/A
Name Lipo2000转染试剂
CAT# 029-1.5mL
CAS# N/A
Storage# 4℃干燥避光
Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# N/A
Em(nm)# N/A
MW# N/A
Solvent# N/A
官方微信

400-686-3443