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Western Blot-ECL特超敏发光液

ECL Plus®高敏发光液

商品编号： 044-100mL; 044-500mL

500元/套(50mL+50mL); 2000元/套(250mL+250mL)

ECL Plus®高敏发光液详细说明书

详细说明书 ECL Plus®高敏发光液MSDS

ECL Plus®高敏发光液MSDS

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ECL Plus®高敏发光液技术资料

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产品介绍

ECL Plus^®化学发光底物说明书

DuraECL^®, FemtoECL^®，PicoECL^®，ECLplus^®为北京富百科生物技术有限公司注册商标，未经授权严禁使用！

保存：室温运输，收到后在4℃避光下储存试剂

一. 产品描述：

ECL Plus^®超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了富百科核心技术基于“荧光震荡”机理设计的发光底物系统。可通HRP实现低皮克级(以HRP浓度为准)的免疫印迹检测，其灵敏度，发光时间和背景均明显优秀。

（1）可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)，极其节省抗体。

（2）简单易用— 可替代其它公司的ECL发光底物，操作步骤无需进行特别优化

（3）灵敏度更高— 可检测低皮克级的蛋白

（4）信号持续时间更长— 光信号持续时间长达5小时

（5）更多成像方法— 适用于X射线胶片、CCD或激光成像仪

（6）价格更经济— 相比其他品牌的类似产品，不仅具有高品质和高性能，同时价格也更低

二. 用途：用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。

三. 使用方法:

1. 执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。

操作概述

注：优化抗原和抗体的浓度。必须使用建议的抗体稀释度，以保证阳性结果。

1) 将一抗浓度稀释到0.05～1ug/ml

2) 将二抗浓度稀释到0.005～0.04ug/mL

3) 将两种底物组份按1:1比例混合，制备底物工作液。

注：暴漏于日光或任何其他强光可能损害工作液，为获得最佳结果，将此工作液保存在琥珀色瓶中，并避免长期暴漏于任何强光。短时间暴漏于实验室常规照明不会损害该工作液。

4) 将印迹膜在ECL底物工作液中孵育5分钟。

5) 吸出多余试剂。用清洁的塑料膜盖住该印迹膜。

6) 使印迹膜在X光胶片上曝光。

2. Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液A和B，放入干净容器中混合。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3. 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液（0.125mL发光工作液/cm²膜）中，与发光工作液充分接触。室温孵育3分钟，准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。

4. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

5. 打开X光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖Western Blot膜的保鲜膜固定在暗盒内，蛋白带面向上。

6. 暗房内压X光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。

四. 储存：4 ^oC密封避光保存一年以上。短期可放置室温。

五. 安全性：无特殊毒性，按普通化学品处理。

六. 注意事项：

（1）步骤1～5可在日光灯下操作；但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。

（2）长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。

（3）发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使X光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光，因而弱带可曝光1-10小时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL发光和曝光。

（4）由于超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗1:1000～1:4000，二抗1:2000～1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败。

（5）某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。

（6）使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。

（7）NaN₃能抑制HRP活性，回收第二抗体应避免使用NaN₃，如必需使用勿超过0.01%。

不同ECL发光液检测灵敏度

产品名称	检测浓度	推荐一抗孵育浓度（ng/mL）	推荐二体孵育浓度（ng/mL）
ECL plus	皮克级~10^-12g	一抗浓度：100～500	二抗浓度：10～50
Pico ECL	皮克级至飞克级10^-12g～10^-15g	一抗浓度：10～200	二抗浓度：5～50
Femto ECL	小于飞克级<10^-15g	一抗浓度：2～100	二抗浓度：2～20
Dura ECL	小于飞克级<10^-15g	一抗浓度：1～100	二抗浓度：1～10

特别提醒：

1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅。

2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！

产品参数

Name	ECL Plus®高敏发光液
CAT#	044-100mL; 044-500mL	CAS#	N/A
Storage#	Store in refrigerator (2°C to 8°C)& Sealed & desiccated & Minimized light exposure	Shelf Life#	12 months
Ex(nm)#	N/A	Em(nm)#	N/A
MW#	N/A	Solvent#	N/A

Name	ECL Plus®高敏发光液
CAT#	044-100mL; 044-500mL
CAS#	N/A
Storage#	Store in refrigerator (2°C to 8°C)& Sealed & desiccated & Minimized light exposure
Shelf Life#	12 months
Ex(nm)#	N/A
Em(nm)#	N/A
MW#	N/A
Solvent#	N/A

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ECL plus详细说明书

官方微信

400-686-3443