详细说明书
技术资料SafeStain® Nucleic Acid GelStain
SafeRed®, SafeView®, SafeStain®和GelStain®为北京富百科生物技术有限公司注册商标，未经授权严禁使用！
1. 带形美观：富百科专利产品第四代核酸染料SafeStain完全克服了国外同类染料分不开大片段DNA的缺点，电泳条带清晰整齐美观。(发明专利ZL202210145256.6)
2.方便观测：用手持紫外灯或者手持蓝光仪都可以随时观察电泳情况。
5. Page胶肉眼可观测条带(不需要激发光,包括紫外和蓝光）。
6. 迁移率好：EB小分子很快跑出胶外，所以EB容易导致小DNA片段看不清，大分子SafeStain完全克服这一点。
7. 定量准确：适用于核酸分子大小的确定和定量，EB对小DNA片段定量不准确。
9. 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
10. 稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中稳定。
12. 信噪比好：样品荧光信号强，背景信号低，肉眼可观测到亮度明显比EB强，EB会导致胶的整体背景稍微高些，经常出现阴阳背景。
13. 操作简单：与EB用法完全一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗。
14. 适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
产品包装： SafeStain 10000x Nucleic Acid Gel Stain 500uL/支； 储存条件： 室温避光可保存24个月。
制胶时加入SafeStain核酸染料(染料灵敏，每100mL 琼脂糖溶液中加入10μL SafeStain原装液即可)。 按常规方法电泳。
（1） 实验样品：质粒DNA，DNA marker（国产的DNA marker浓度太高，至少稀释2～3倍后使用!）
（5） 仪器：电泳仪（130v），移液器(0.5~10ul)，凝胶成像仪
（1） 制胶：将0.5g琼脂糖溶于50mL 1X TBE电泳缓冲液中，加热至琼脂糖完全融化。将融好的琼脂糖溶液室温放置50℃左右加入5ul的SafeStain凝胶电泳染料，摇匀。
（2） 倒胶：将制好的琼脂糖凝胶缓慢倒于制胶托盘内，避免产生气泡。将点样梳子垂直置于电泳胶膜的一端，距离托盘底部约1mm。放置时尽量保持平稳，切勿晃动。
（3） 置胶：待约30分钟左右胶体充分凝固后，缓慢垂直向上拔起点样梳子，切勿用力过猛。（夏季适当延长凝胶时间）
（4） 将琼脂糖凝胶放入电泳槽内，加入电泳缓冲液，使电泳缓冲液液面高于凝胶面约1~2mm。
（5） 将混合溴酚蓝指示剂的DNA样本（1ul溴酚蓝与2ul DNA标本混合）加入到点样孔内。
（6） 盖上电泳槽盖，开启电源，使DNA从负极移向正极恒压电泳(电压恒定在120~130v之间，一般可选择130V)。
（7） 当DNA条带距离点样孔约1~2cm后关闭电源，(约30～40分钟)取出凝胶。
（8） 用 302nm 激发的 UV 凝胶成像系统观察结果。
*注：此方法染色染料用量相对较少。染料加入胶中可直接使用微波炉加热，制好的胶溶液可以在室温下保存直至用完。
ü 因为EB是插入DNA内部变成一个整体分子，所以不容易出现迁移/弥散的问题，而大分子的SafeStain与DNA是通过静电吸引非共价结合的，在DNA外面偶尔出现条带迁移，特别是大片段DNA！
ü 染料过于灵敏，建议未知浓度的样品的稀释一倍后上样，特别是含大片段多的样品。推荐上样量为50～200ng/泳道(8泳道小胶孔)
ü 与EB相比，SafeStain电泳电压要低一些，电泳时电压不宜过高，一般不要超过130V。跑胶的时间40～60min。
ü SafeStain染料和样品混合后，点样到琼脂糖凝胶中，不推荐这种点样法。
ü 如果总是看到条带弥散或分离不理想，为了避免染料可能对DNA迁移的干扰，建议使用电泳后染胶。使用后染法（泡染法）染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关！
*此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
（1）按照常规方法进行电泳。 （用于胶回收等DNA高浓度的样品实验强烈推荐泡染的方法！）
（4）用 302nm 激发的 UV 凝胶成像系统或者蓝光仪下观察结果。
*注意事项：用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右；1× SafeStain®染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。
三．核酸电泳的PAGE步骤：Page胶实验室灯光下，肉眼可观测条带，不需要外源激发光（包括紫外和蓝光）。
2）用配置凝胶溶液同一批次的5×TBE灌满缓冲液槽。用注射器排除凝胶底部的气泡。
3）用注射器吸取1×TBE冲洗加样孔。将DNA样品和适量的6×凝胶上样缓冲液混合，用微量移液管加入加样孔。
4）将电极与电源相连（正极接下槽），打开电源一般90V；1～8V/cm。进行电泳9h。
5）电泳至标准参照染料迁移至所需位置（一般是电泳到二甲苯完全迁出，溴酚蓝距底边2～3cm停止）。关闭电源，拔掉插头，弃去电泳槽中的电泳液。
6）将凝胶取下来放入，染色皿中，加1X SafeStain的1X缓冲液中的振荡染色30-60分，放置在紫外检测即可。
*注意事项：与琼酯糖凝胶不同，不能用预染或点染的方法；只能用泡染的方法显色，由于聚丙烯酰胺比较致密，染料不容易深入，显色效果没有琼酯糖凝胶好。
1）SafeStain同时适用于紫外成像仪，激光成像仪和蓝光仪,下观测的核酸电泳染料！
2) Page胶实验室灯光下，肉眼可观测条带, 不需要外源激发光（包括紫外和蓝光）。
| Name | SafeStain® 核酸染料(>SafeRed), Page胶肉眼可观测条带(不需要激发光) | ||
|---|---|---|---|
| CAT# | 088-500uL | CAS# | N/A |
| Storage# | 4℃ Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing | Shelf Life# | 24 months |
| Ex(nm)# | 290nm，304nm，480nm，520nm | Em(nm)# | 520nm，590nm |
| MW# | Solvent# | ||
| Name | SafeStain® 核酸染料(>SafeRed), Page胶肉眼可观测条带(不需要激发光) |
|---|---|
| CAT# | 088-500uL |
| CAS# | N/A |
| Storage# | 4℃ Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing |
| Shelf Life# | 24 months |
| Ex(nm)# | 290nm，304nm，480nm，520nm |
| Em(nm)# | 520nm，590nm |
| MW# | |
| Solvent# |
