本品Super Green(可替代Sybr Green)是用 DMSO 溶解,因为 DMSO 溶点是 18.3℃,使用前请放置到室温充分溶解。
1. 相对安全:尽管可以穿透细胞膜进入细胞内,属于花菁染料,使用相对安全,富百科AMES实验显示在工作浓度(凝胶染色浓度)下没有发现致突变性,可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。参考文献:卫生研究-2020-49(6)-938
2. 高灵敏:紫外凝胶透射仪下灵敏度高 EB 染色法 5-10 倍,可见光透射仪下的灵敏度比 EB 染色法高20~30 倍。
4. 操作简单:无须脱色或冲洗,即可用紫外凝胶透射仪观察或可见光透射仪观察。
5. 适用范围广:可适用于多种电泳分析,如琼脂糖凝胶电泳和 PAGE 凝胶电泳。
6. 使用方便:不影响其它修饰酶作用(如:Taq 酶、内切酶、T4 连接酶、反转录酶等)。
1) 制胶时加入 Super Green I 核酸染料。冷却胶到 50℃左右,每 100ml 胶中加入1-3µl Sybr Green I 核酸染料(见图 1)。
3) 用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃, 观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注:此方法染色能准确确定片段分子量且用量较少。1ml 染料可以做 1000 块10 ml 胶,每块胶点 50 个样,可做 50000 次。
6) 上样、电泳:按常规操作。用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃, 观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注:用点染法染色时,灵敏度最高,染料用量最少。通常点一个样加入 1µL 即 可,可以使用 10000 次, 但大片段稍有滞后现象,如果需要更准确确定分子量(与Marker 对比),建议使用胶染法。
2) 用 pH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如:TAE, TBE),按照 1﹕1000 的比例稀释 Sybr Green I
5) 用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃, 观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注:用泡染方法染色时,可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量是三种方法中用量最大的。
1. Super Green核酸染料样品点染方法中,电泳不要超过 2 小时,以免核酸染料从 DNA/RNA 上分离出来,产生弥散状条带。
2. 用点染方法染色时,条带稍有滞后现象,如果需要确定片段精确分子量(和 Marker 对比),建议用胶染法和泡染法。
3. 常规用酒精沉淀核酸过程中,Super Green I 核酸染料可以全部从核酸上去掉。
4. DNA电泳请选择 SuperGreen I 染料,RNA 电泳请选择Super Green II染料,两种染料不通用。
5. Super Green I 核酸染料对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染 色等使用过程中用聚丙烯类容器。
6. 可以加Orange Red 作为标记. pH值在7.5-8.3之间,不要微波加热,加入热胶的温度低于50度
注意事项: 所有产品仅限用于研发,必须生物技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!
EB Super Green I DNA Stain EB Super Green I
EB Super Green I DNA Stain EB Super Green II RNA Stain
=1:10 incubate at RT for 3~5min then load 5,2,1uL per lane. Fig4. Sybr Green II点染(RNA)
Name | Super Green I GelStain核酸染料(~Sybr Green)电泳级 | ||
---|---|---|---|
CAT# | 001-100uL | CAS# | N/A |
Storage# | 4°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing! | Shelf Life# | 24 months |
Ex(nm)# | 497 | Em(nm)# | 525 |
MW# | N/A | Solvent# | DMSO |
Name | Super Green I GelStain核酸染料(~Sybr Green)电泳级 |
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CAT# | 001-100uL |
CAS# | N/A |
Storage# | 4°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure & Minimized Freezing And Thawing! |
Shelf Life# | 24 months |
Ex(nm)# | 497 |
Em(nm)# | 525 |
MW# | N/A |
Solvent# | DMSO |