本品用DMSO溶解,因DMSO的熔点是18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解。
Dufinder 是一种新型核酸染料,具有相对安全、灵敏等突出优点,可以代替溴化乙锭(EB)作为各种核酸电泳的染色剂。与强致癌性的EB不同,Dufinder 属于花箐类染料,毒性很低,使用安全,可有效保护实验操作者和环境。
Dufinder 与dsDNA 结合荧光信号可增强800~1000倍,其检测核酸的灵敏度比EB染色法平均高10倍左右。
Dufinder 染料最大吸收峰为470nm,与该染料结合的核酸呈现绿色荧光。用可见光凝胶透射仪观测。也可用紫外凝胶透射仪观测,但效果稍差。
l 相对安全:尽管可以穿透细胞膜进入细胞内,属于花菁染料,使用相对安全,富百科AMES实验显示在工作浓度(凝胶染色浓度)下没有发现致突变性,可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。参考文献:卫生研究-2020-49(6)-938
l 灵敏: 检测核酸的灵敏度平均高于EB染色法10倍左右。
l 经济: 价格低于进口同类产品5~10倍。
l 操作简单: 本染料有多种使用方法,操作简单 。
l 通用性: 适用于多种核酸电泳分析。可以对DNA、RNA、及寡核苷酸等进行染色。
l 兼容性: 对常用酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、连接酶等)没有抑制作用。
方法一:胶染法(用法同EB)(推荐方法)
(1) 制胶时加入Dufinder 核酸染料。(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL Dufinder 10,000× 储液,以此比例类推)。
(2) 按照常规方法进行电泳。
u 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
方法二:泡染法
(1) 按照常规方法进行电泳。
(2) 用PH 7.0~8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1(或10000:2)的比例稀释Dufinder染料浓缩液,混匀,制成染色溶液,。
(3) 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10~45分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。凝胶越厚、浓度越高,所需染色时间越长。也可以在聚丙烯酰胺凝胶上直接染色(玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理,避免染料吸附在玻璃表面上)。将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色10~30分钟。
(4) 观测。
1. 该染料为花箐类染料,富百科AMES实验显示在凝胶染色浓度下无致突变性。
2. 染料从冰箱中取出后应恢复至室温,使溶液充分融化,并混匀。
3. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,Dufinder可以全部从双链核酸上去掉。
4. Dufinder对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
5. 储存:储存于4℃,有效期至少一年。
特别提醒:
1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅!
2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!
Name | DuFinder核酸染料(10,000× DMSO溶液) | ||
---|---|---|---|
CAT# | 039-500uL | CAS# | N/A |
Storage# | 4°C干燥避光 | Shelf Life# | 12个月 |
Ex(nm)# | 508 | Em(nm)# | 533 |
MW# | N/A | Solvent# | DMSO |
Name | DuFinder核酸染料(10,000× DMSO溶液) |
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CAT# | 039-500uL |
CAS# | N/A |
Storage# | 4°C干燥避光 |
Shelf Life# | 12个月 |
Ex(nm)# | 508 |
Em(nm)# | 533 |
MW# | N/A |
Solvent# | DMSO |