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FITC

  • 商品编号:120
  • 销 售 价:¥245.00-¥7950.00
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详细说明书

产品参数

Name FITC
CAT#120CAS#3326-32-7
StorageDesiccated dark freezerShelf Life24 months
Ex (nm)494Em (nm)520
MW389.38SolventDMSO

产品介绍

FITC

CAS#:3326-32-7

中文名:异硫氰酸荧光素

英文名Flourescein iso-thiocyanate

结构式



分子式:C21H11NO5S

分子量:389.38

性质

1. 外观:黄色粉末

2. 纯度:≥95% (HPLC)

3. 产品描述:

FITC能和各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中具有强烈的黄绿色荧光。通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。用于医学,农学和畜牧等方面,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。

4. FITC标记抗体流程:

(1)  将待交联的蛋白(浓度³1mg/mL)对交联反应液透析三次4℃,至pH=9.0。交联反应液配制方法:7.56gNaHCO3,1.06gNa2CO3,7.36gNaCl,加水定容至1 L。

(2)  将FITC溶于DMSO中,浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。

(3)  按P:F(蛋白质:FITC)=1mg:150μg 的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中,边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀,暗处4℃反应8h。

(4)  加入5mol/L的NH4Cl至终浓度50mmol/L,4℃终止反应2h。

(5)  将交联物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。

(6)  交联物的鉴定

蛋白浓度(mg/mL) = [ A280– 0.31×A495 ] / 1.4

F/P比例: 3.1×A495 / [A280 – 0.31×A495 ],该值应介于2.5~6.5之间。

(7)  FITC交联的蛋白应置于pH 7.4的磷酸盐缓冲液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,4℃避光保存。

储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。