详细说明书
技术资料DuraECL®, FemtoECL®，PicoECL®，ECLplus®为北京富百科生物技术有限公司注册商标，未经授权严禁使用！
表1:与 Pico ECL化学发光底物，一起使用的抗体稀释度范围
• PicoECL —用于辣根过氧化物酶(HRP)的增强型化学发光底物
• 低皮克级灵敏度—检测硝化纤维素膜或PVDF膜上低皮克级的蛋白条带
• 长信号持续时间— 在条件优化情况下，经底物孵育的印迹条带能够持续输出6至8小时的可检测光信号
• 稳定试剂— 工作液在24小时内保持稳定；试剂盒在室温下可稳定放置长达1年
• 0.2至 1.0 µg/mL一抗（以1 µg/mL储存液稀释1:1,000至1:5,000倍）
• 10至 50 ng/mL二抗（以1 µg/mL储存液稀释1:20,000至1:100,000倍）
注：优化抗原和抗体的浓度。必须使用建议的抗体稀释度，以保证阳性结果。有关建议的稀释度范围请参考其他所需材料。
注：日光或任何其他强光可能损害工作液，为获得最佳结果，将此工作液保存在琥珀色瓶中，并避免任何强光长期照射。短时间实验室常规照明不会损害该工作液。
4) 将印迹膜在West Pico ECL底物工作液中孵育5分钟。
1) 将印记膜从蛋白转印设备中取出，加入合适的封闭液在温室下孵育20-60分钟，同时振荡。以封闭膜上非特异性蛋白结合位点。请注意：使用在前文建议的抗体稀释度是非常重要的。
2) 将膜从封闭液中取出，与一抗工作液在温室孵育1小时，同时振荡；或在28℃孵育过夜，不振荡。
3) 将足量的洗涤缓冲液加至膜上，保证缓冲液将膜完全覆盖。振荡孵育≥5分钟，更换洗涤缓冲液并重复该步骤4-6次。增加洗涤缓冲液体积，洗涤次数和洗涤时间有助于降低背景信号。
4) 将HRP标记的二抗工作液与膜在温室孵育1小时，同时振荡。
5) 重复步骤3，以除去未结合的HRP标记二抗。注：膜与HRP标记二抗孵育后必须进行彻底洗涤。
6) 将A溶液与B液等比例混合，制备成工作液。每cm2膜使用0.01～0.1ml工作液。工作液可以在温室下稳定8小时。注：日光或任何其他强光下可能损害工作液，为获得最佳结果，将此工作液保存在琥珀色瓶中，并避免任何强光长期照射，短时间实验室常规照明不会损害该工作液。
8) 从工作液中取出印记膜，并置于一个塑料片或清洁的塑料纸（膜）中，用一张吸水纸吸除多余的液体，并从印记和塑料纸之间小心地压出气泡。
9) 将包在塑料纸（膜）中的印记膜置于胶片暗盒中，蛋白质面朝上，除适用于胶片曝光的灯（如红色安全灯）之外，关闭所有的灯。
注;胶片必须在曝光期间保持干燥，为获得最佳效果，才去一下措施：
* 切莫将印记膜置于已显影的胶片上，因为胶片上的化学物质会减弱信号。
警告：胶片与膜之间的任何移动可能在胶片上造成人为的非特异信号。
11) 使用合适的显影剂和定影剂对胶片进行显影。如果信号太强，则缩短曝光时间或将印记膜进行剥离并降低抗体浓度重新检测。
| Name | Pico ECL®超敏发光液 | ||
|---|---|---|---|
| CAT# | 045-100mL; 045-500mL | CAS# | N/A |
| Storage# | 4°C Sealed/desiccated/Minimized light exposure | Shelf Life# | 12 months |
| Ex(nm)# | N/A | Em(nm)# | N/A |
| MW# | N/A | Solvent# | N/A |
| Name | Pico ECL®超敏发光液 |
|---|---|
| CAT# | 045-100mL; 045-500mL |
| CAS# | N/A |
| Storage# | 4°C Sealed/desiccated/Minimized light exposure |
| Shelf Life# | 12 months |
| Ex(nm)# | N/A |
| Em(nm)# | N/A |
| MW# | N/A |
| Solvent# | N/A |
