详细说明书
技术资料Dura ECL® 超敏发光液
DuraECL®, FemtoECL®，PicoECL®，ECLplus®为北京富百科生物技术有限公司注册商标，未经授权严禁使用！
Dura ECL®是我们富百科的最高灵敏度和最长发光时间的底物是用于辣根过氧化物酶(HRP)的增强型化学发光底物，有以下特点：
• 灵敏—使用适当的一抗和二抗时，可在硝化纤维膜或PVDF膜上检测丰度为飞克级的蛋白条带
• 长信号持续时间—优化条件下，可检测的光信号输出长达16小时
• 稳定试剂—试剂盒组分能够在4°C条件下稳定放置一年，在室温下可稳定放置6个月
• 1ng至0.2 µg/mL一抗（以1 µg/mL储存液稀释1:5,000至1:100,000倍）
• 2ng至10 ng/mL二抗（以1 µg/mL储存液稀释1:100,000至1:500,000倍）
当Dura ECL底物与优化的抗体浓度和封闭缓冲液配合使用时，可检测到常规ECL底物无法检测的低丰度靶标蛋白。
注：优化抗原和抗体的浓度。必须使用建议的抗体稀释度，以保证阳性结果。有关建议的稀释度范围请参考其他所需材料。
1) 将一抗浓度稀释到1ng至0.2 ng/mL（以1 µg/mL储存液稀释1:5,000至1:100,000倍）
2) 将二抗浓度稀释到2ng至10 ng/mL（以1 µg/mL储存液稀释1:100,000至1:500,000倍）
注：日光或任何其他强光可能损害工作液，为获得最佳结果，将此工作液保存在琥珀色瓶中，并避免任何强光长期照射。短时间实验室常规照明不会损害该工作液。
4) 将印迹膜在 Femto ECL底物工作液中孵育5分钟。
1) 将印记膜从蛋白转印设备中取出，加入合适的封闭液在温室下孵育20-60分钟，同时振荡。以封闭膜上非特异性蛋白结合位点。请注意：使用在前文建议的抗体稀释度是非常重要的。
2) 将膜从封闭液中取出，与一抗工作液在温室孵育1小时，同时振荡；或在28℃孵育过夜，不振荡。
3) 将足量的洗涤缓冲液加至膜上，保证缓冲液将膜完全覆盖。振荡孵育≥5分钟，更换洗涤缓冲液并重复该步骤4-6次。增加洗涤缓冲液体积，洗涤次数和洗涤时间有助于降低背景信号。
4) 将HRP标记的二抗工作液与膜在温室孵育1小时，同时振荡。
5) 重复步骤3，以除去未结合的HRP标记二抗。注：膜与HRP标记二抗孵育后必须进行彻底洗涤。
6) 将A溶液与B液等比例混合，制备成工作液。每cm2膜使用0.01～0.1ml工作液。工作液可以在温室下稳定8小时。注：日光或任何其他强光下可能损害工作液，为获得最佳结果，将此工作液保存在琥珀色瓶中，并避免任何强光长期照射，短时间实验室常规照明不会损害该工作液。
8) 从工作液中取出印记膜，并置于一个塑料片或清洁的塑料纸（膜）中，用一张吸水纸吸除多余的液体，并从印记和塑料纸之间小心地压出气泡。
9) 将包在塑料纸（膜）中的印记膜置于胶片暗盒中，蛋白质面朝上，除适用于胶片曝光的灯（如红色安全灯）之外，关闭所有的灯。
注;胶片必须在曝光期间保持干燥，为获得最佳效果，采取以下措施：
* 切莫将印记膜置于已显影的胶片上，因为胶片上的化学物质会减弱信号。
警告：胶片与膜之间的任何移动可能在胶片上造成人为的非特异信号。
11) 使用合适的显影剂和定影剂对胶片进行显影。如果信号太强，则缩短曝光时间或将印记膜进行剥离并降低抗体浓度重新检测。
| Name | Dura ECL®特超敏发光液 | ||
|---|---|---|---|
| CAT# | 047-100mL; 047-500mL | CAS# | N/A |
| Storage# | 4℃ Sealed & desiccated & Minimized light exposure | Shelf Life# | 12 months |
| Ex(nm)# | N/A | Em(nm)# | N/A |
| MW# | N/A | Solvent# | N/A |
| Name | Dura ECL®特超敏发光液 |
|---|---|
| CAT# | 047-100mL; 047-500mL |
| CAS# | N/A |
| Storage# | 4℃ Sealed & desiccated & Minimized light exposure |
| Shelf Life# | 12 months |
| Ex(nm)# | N/A |
| Em(nm)# | N/A |
| MW# | N/A |
| Solvent# | N/A |
