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Super Fluor 750 SE (~Alexa Fluor 750 SE)
Super Fluor荧光探针具有更强的荧光强度
Super Fluor荧光探针有更广的pH应用范围(pH 4~10)
Super Fluor荧光探针更好的抗淬灭性。
Super Fluor在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等荧光染料。
Super Fluor 488,555, 647, 680, 750 SE活化酯标记抗体
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表 Super Fluor 488,555, 647, 680, 750活化酯的性质参数
1) 蛋白溶解:用0.1 M NaHCO3溶解至终浓度为2mg/mL
2)染料溶解:活化Super Flour SE染料固体粉末从冰箱放入干燥器中慢慢升至常温后,用无水DMSO(推荐使用SigmaAldrich货号276855)将染料配置浓度为1 mg/mL。
4)纯化:用透析法或者葡聚糖Sephadex纯化产品后,产品冷冻干燥成粉末或在0.01 M PBS/2mM叠氮化钠溶液中,-20℃避光储存。
对于IgG 等大多数抗体来说,摩尔吸光系数为203000,F/P值在4~9 之间是最合适。
1)用PBS 精确倍数稀释定量的少许纯化过的偶联蛋白,在1cm比色皿中测定280nm和750nm的光吸收;
2)计算样品中的蛋白浓度:蛋白摩尔浓度=(A280-(A750×0.04))×稀释倍数/203000
3)计算标记比例:每摩尔蛋白结合的染料摩尔数=A750×稀释倍数/(240000×蛋白摩尔浓度)
请注意:未开封的粉末在避光干燥-20℃可存放6月。其水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的染料最好立即使用;无水的DMSO溶液-20°C保存最多2个星期。
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