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钙荧光探针bioFluo-3, AM

bioFluo-3, AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。

bioFluo-3 AM穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内，bioFluo-3, AM若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为525～530nm。

bioFluo-3, AM可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
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产品编号
21010-100ug/365元;1mg/ 1650元
所属分类
细胞染色/凋亡及离子探针
数量
-
+
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暂时无货
1
产品描述
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钙荧光探针bioFluo-3, AM

bioFluo®为北京富百科生物技术有限公司注册商标，未经授权严禁使用！

CAS#：121714-22-5

中文名：钙荧光探针bioFluo-3, AM也称之为Fluo-3, AM

英文名：1-[2-Amino-5-(2,7-dichloro-6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester

结构式：

分子式：C51H50Cl2N2O23 分子量：1129.85

储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年

性质：

1. 外观：红色粉末

2. 纯度：≥90%（HPLC）

3. 产品描述： 

钙指示剂是结合 Ca2+ 后显示荧光增强的分子。Fluo-3 应用在流式细胞分析上，如涉及笼状螯合剂光活化、第二信使和神经递质的实验以及基于细胞的药理学筛选，用于 Ca2+ 信号转导的空间动力学成像。Fluo-4 是 fluo-3 的类似物，其中两个氯取代基被氟取代，导致在 488 nm 波长处的荧光激发增强，因此荧光信号水平更高。将溶解后的指示剂直接加入含有培养细胞的培养皿中，即可向细胞加载 AM 酯形式的这类钙离子指示剂。这些指示剂可用于荧光和共聚焦显微镜、流式细胞分析以及微孔板筛选应用。

bioFluo-3, AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内，Fluo-3若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为525～530nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

4. 操作说明（for Human T cells）*
（1） 试剂
2 mM的bioFluo-3, AM/DMSO（将1mg Fluo-3, AM溶于442µL DMSO） 
Pluronic F127
Hanks•balanced salt solution（HBSS） 
HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）
（2） 操作
①. 向bioFluo-3, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以    防止Fluo-3, AM在HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
②. 用HBSS稀释Fluo-3, AM溶液，制备4µM的Fluo-3, AM工作液。
③. 将Fluo-3, AM工作液加入细胞，在37℃培养20分钟。
④. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。
⑤. 用HEPES buffer saline洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1×105 cells/mL的溶液。
⑥. 37℃下培养10分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长506nm，发射波长526nm。  
*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。

 

特别提醒：

1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅!

2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！

 

产品参数

Name 钙荧光探针bioFluo-3, AM
CAT# 22010 CAS# 121714-22-5
Storage# −20°C Sealed & desiccated & Minimized light exposure Shelf Life# 24 months
Ex(nm)# 506 Em(nm)# 526
MW# 1129.85 Solvent# DMSO
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