细胞染色及离子探针
DiD 高氯酸盐
商品编号: 22031-25mg
945元/瓶(25mg)
产品介绍

DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 细胞膜染料

产品描述

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。

表1.  DiD,DiO,DiI,DiR,DiS的化学性质

目录号

产品名称

规格

分子量

Ex/Em

推荐滤光器*

DiD

22033

DiD labeling   solution

10 mL

959.91

644/663 nm

XF47-Omega, 31023-Chroma

DiO






22040

DiOC7(3) iodide

100 mg

600.57

482/504 nm

XF23-Omega, 31001-Chroma

22046

DiOC6(3) iodide

100 mg

572.52

482/504 nm

XF23-Omega, 31001-Chroma

22066

DiO perchlorate

100 mg

881.7

484/501nm

XF23-Omega, 31001-Chroma

DiI

22035

DiIC12(3)   perchlorate

100 mg

765.55

549/565 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

22044

DiIC16(3)   perchlorate

100 mg

877.76

549/565 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

22052

DiIC18(3)-DS

50 mg

993.53

555/570 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

22054

DiIC18(5)-DS

50 mg

1019.57

650/670 nm

XF47-Omega, 31023-Chroma

22056

DiIC1(5) iodide

100 mg

510.45

638/658 nm

XF47-Omega, 31023-Chroma

22101

DiI iodide

100 mg

961.32

549/565 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

22102

DiI perchlorate

100 mg

933.87

549/565 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

22103

DiI triflate

100 mg

983.48

549/565 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

DiR**

22070

DiR iodide

10 mg

1013.39

748/780 nm

XF112-Omega, 41009-Chroma

DiS

22073

DiSC2(3)

25 mg

492.44

560/571 nm

XF32-Omega, 31002-Chroma

22076

DiSC3(5)

100 mg

546.53

660/675 nm

XF47-Omega, 31023-Chroma

* Omega滤光器由Omega公司提供(www. omegafilters.com);Chroma滤光器由Chroma公司提供(www. chroma.com)。

**DiR的发射波长肉眼不可见,所以需要配备CCD镜头或其他的近红外检测仪器。

 使用方法

1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备

(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。

注意:未使用的储存液保存在-20°C,避免反复冻融。

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。

注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。 

2. 悬浮细胞染色

(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。

(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。

(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。

(5)重复(3),(4)步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。

4. 显微镜检测

(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。

(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

5. 流式细胞仪的检测

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。

 

储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。


产品参数
Name DiD 高氯酸盐
CAT# 22031-25mg CAS# N/A
Storage# −20°C干燥避光 Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# N/A Em(nm)# N/A
MW# N/A Solvent# N/A
Name DiD 高氯酸盐
CAT# 22031-25mg
CAS# N/A
Storage# −20°C干燥避光
Shelf Life# 12个月
Ex(nm)# N/A
Em(nm)# N/A
MW# N/A
Solvent# N/A
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400-686-3443